Les chambres du Vatican étaient les appartements du pape Jules II (1503-1513), qui ne voulait pas vivre dans ceux de son prédécesseur Alexandre VI.
Raphaël Sanzio (1483-1520) créa les fresques des salles suivantes : la Salle de la Signature (1508-1511), la Chambre d’Héliodore (1511-1514), la Salle de l’incendie du Borgo (1514-1517) et la salle de Constantin (1517-1524).
Salle de Constantin
La Salle de Constantin fut largement réalisée par les élèves de Raphaël. Parmi les scènes représentées : le Baptême de Constantin, la Vision de la Croix de Constantin, la bataille du pont Milvius, etc
Le plafond, de Thomas Laureti (1585), représente le Triomphe du christianisme contre le paganisme, symbolisé par une statue brisée sur le sol.
Chambre d’Héliodore
Dans la Chambre d’Héliodore, sont représentés les actes de Dieu en faveur des hommes: la Messe de Bolsena avec le miracle de la transsubstantiation du pain dans le corps du Christ et du vin en son sang ; la libération de Saint-Pierre de la prison, etc
Salle de la Signature
Dans la Chambre de la Signature sont représentés les trois catégories néoplatoniciennes du « vrai », du « bon » et du « beau ». Le vrai surnaturel est dépeint dans la dispute du Saint-Sacrement (la théologie), le vrai rationnel dans l’École d’Athènes (la philosophie), le Bon dans les représentations de la vertu et le droit (la justice), et le beau dans le Parnasse (la poésie).
Dans l’École d’Athènes, un des plus célèbres tableaux de Raphaël, sont représentés les personnages de Platon et de nombreux philosophes sous les traits d’hommes de l’époque : Héraclite (sous les traits de Michel-Ange), Euclide (sous les traits de Bramante), Diogène, Ptolémée et Zoroastre. Le deuxième personnage sur la droite avec la casquette verte est le portrait de Raphaël.
Dans le Parnasse, Apollon est entouré de Muses, poètes et écrivains célèbres, dont Homère et Dante.
Salle de l’incendie du Borgo
Dans la dernière salle peinte, sont représentés les grands événements historiques survenus sous les papes Léon : l’Incendie du Borgo avec l’intervention miraculeuse du pape Léon IV en 847, le Serment de Léon III, Le Couronnement de Charlemagne par le pape Léon III en 800, et la Bataille d’Ostie mené avec succès par Léon IV contre les Sarrasins en 849.
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